Spherotech成立于1992年，制造和供应用于生物医学，诊断和药物开发的均匀单分散的微粒和纳米颗粒。总部位于伊利诺伊州森林湖市芝加哥以北25英里处. 作为微米和纳米颗粒解决方案的全球供应商，我们的科学家可以制造高质量的聚苯乙烯荧光，顺磁性，铁磁性和彩色染色的颗粒.
CytoFLEX流式细胞仪的性能测试
细胞计数法是一种广泛使用的生物学技术，用于表征不同的细胞参数。在本文中，对CytoFLEX流式细胞仪进行了性能测试，以确定其执行高度复杂的应用程序的能力。为此，对Beckman Coulter的新型CytoFLEX流式细胞仪进行了针对小颗粒分辨率，种群分辨率，动态范围，灵敏度，稳定性，线性和可重复性性能测试的评估。使用市售的磁珠标准品评估了各种参数的性能预期。
CytoFLEX系统的评估是在迈阿密的贝克曼库尔特实验室进行的；普渡大学细胞计数实验室（PUCL）；和拉荷亚生物工程研究所。还通过与中山大学医学院的合作获得了更多信息；和匹兹堡大学癌症中心的Al Donnenberg。
CytoFLEX系统配置了3个激光（405、488和638nm），12个参数和9个荧光检测器。此外，该仪器还具有紫色激光侧向散射通道（VSSC）选件，可用于检测小颗粒。
方法与材料
使用CytoFLEX Daily QC Fluorospheres和CytExpert软件确定质量控制稳健的CV（rCV）。rCV大约是第75个百分点减去第25个百分点除以中位数，并且不像CV那样偏远。将CytoFLEX Daily QC荧光球收集在三个不同的CytoFLEX系统上，并使用Spherotech 8 Peak Rainbow珠进行线性，分离度，稳定性和分离测试。
以下产品用于微粒测试
- 实验室1（迈阿密贝克曼库尔特）：Spherotech磁珠。0.5和0.2μm
- 实验室2（拉荷亚生物工程研究所）：Polybead聚苯乙烯进样器套件II PolySciences＃21756-1和Polybead聚苯乙烯进样器套件III PolySciences＃16905-1
- 实验室3（PUCL）：PolySciences磁珠0.2、0.3、0.35、0.4和0.5μm
- 实验室4（中山大学医学院，中国广州）：使用贝克曼库尔特粒度标准0.2、0.3和0.5μm乳胶珠（非荧光）混合物进行评估，并使用UPW（超纯水）稀释珠子。
此后，与具有类似激光器和滤光片配置的竞争性仪器进行了比较。
分离指数是指彩虹峰的相邻峰之间的分离，该分离是通过峰MFI之间的差异除以其标准偏差的几何平均值计算得出的。下面给出的公式用于计算分离指数：
分离指数=（MFIpeak2-MFIpeak1）/（SQRT（SDpeak1 ^ 2 + SDpeak2 ^ 2）/ 2）
结果和讨论
QC珠在系统上运行18天。记录了十二个启动和关闭周期，并使用Levey-Jennings监控了rCV。以下数据显示了每种激光器的比较参数。图1显示了18天进行的QC珠的rCV测试，图2显示了 连续运行1小时的8个峰珠的rCV。
图1. 18天内QC珠的rCV分析。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
图2. 8个峰珠上的rCV连续运行一小时。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
在CytoFLEX系统上，将Spherotech 8 Peak Rainbow珠连续运行一小时，并在Peak＃5 PE：2.12％，APC：4.40％和BV421：2.34％上获得rCV数据，表明系统稳定性。
图3.每天在两台仪器上运行Spherotech 8 Peak Rainbow珠子十七天，收集rCV数据并将其绘制在Peak＃5上。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
图4. 3个激光10色检测器的Spherotech 8峰值彩虹珠数据。数据由匹兹堡大学癌症中心提供。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
图5.与标准高复杂度研究细胞计数仪相比，针对珠峰之间的分离指数计算出的Spherotech 8峰彩虹珠数据。数据由匹兹堡大学癌症中心提供。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
图6.与标准高复杂度研究细胞计数仪相比，针对珠峰之间的分离指数计算出的Spherotech 8峰彩虹珠数据。数据特定于红色通道灵敏度。数据由匹兹堡大学癌症中心提供。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
图7.微粒检测。四个独立的实验室运行的是使用侧面散射和VSSC检测到的基于颗粒的小颗粒。数据由匹兹堡大学癌症中心，PUCL，中山大学医学院拉荷亚生物工程研究所提供。图片来源：贝克曼库尔特（Beckman Coulter）
结论
性能测试结果证实，贝克曼库尔特公司开发的高级CytoFLEX流式细胞仪不仅稳定，可重复，而且灵敏度高，特别是在远红和紫光通道中。通过分离指数量化的仪器分离种群的能力通常优于其他可比系统。此外，对小颗粒的评估表明，使用紫罗兰色侧向散射（VSSC）选件可以清晰地分辨出0.2μm的颗粒。此外，CytoFLEX系统能够清楚地区分不同大小的亚微米珠。